染色質(zhì)免疫共沉淀CHIP實(shí)驗

簡(jiǎn)要描述：染色質(zhì)免疫共沉淀CHIP實(shí)驗的原理是在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復合物，并將其隨機切斷為一定長(cháng)度范圍內的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)方法沉淀此復合體，特異性地富集目的蛋白結合的DNA的片段，通過(guò)對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。

更新時(shí)間：2022-12-23
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實(shí)驗原理：
在保持組蛋白和DNA聯(lián)合的同時(shí)，染色質(zhì)被切成很小的片斷，通過(guò)運用對應于一個(gè)特定組蛋白標記的生物抗體，將目標片段（組蛋白發(fā)生特異標記的片段）沉淀下來(lái)。ChIP是利用抗原和抗體的特異性結合以及細菌蛋白質(zhì)的“protein A”特異性地結合到免疫球蛋白的Fc片段的現象合用開(kāi)發(fā)出來(lái)的方法（免疫磁珠結合proteinA，proteinA結合抗體Fc段，抗體結合抗原即發(fā)生特異標記的組蛋白，這里要注意組蛋白是和DNA結合的，這樣就把目標組蛋白和DNA的復合體沉淀下來(lái)了）。再將組蛋白與DNA分離，用獲得的DNA去做PCR分析和序列測定等檢測技術(shù)，從而進(jìn)一步檢測哪些基因的組蛋白發(fā)生了修飾。

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