蛋白實(shí)驗蛋白質(zhì)雙向電泳實(shí)驗注意事項

　　等電位聚焦是一種根據分子攜帶的電荷不同來(lái)分離分子的技術(shù)。蛋白質(zhì)同時(shí)具有酸性基團和堿性基團，在ph值低于等電點(diǎn)時(shí)會(huì )帶有正電荷，在電場(chǎng)中向陰極移動(dòng)。將蛋白質(zhì)置于有遞增ph梯度的凝膠中電泳，蛋白質(zhì)所帶電荷會(huì )一直減少，直到蛋白質(zhì)移動(dòng)到ph值與其等電點(diǎn)相同的區域。在此處，蛋白質(zhì)靜電荷為0，因此停止運動(dòng)，最終蛋白質(zhì)被“聚焦”在ph值和其等電點(diǎn)相同的窄帶中。

　　蛋白實(shí)驗蛋白質(zhì)雙向電泳實(shí)驗注意事項：

　　1.TCA：TCA有毒性，有刺激性氣味，損害呼吸道、眼睛及皮膚，稱(chēng)量時(shí)應戴手套及口罩，避免沾到皮膚及吸入，若不慎接觸，應立即用大量水沖洗后就醫。TCA易潮解，稱(chēng)量時(shí)應迅速。

　　2.PMSF：PMSF有毒，嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚，稱(chēng)量時(shí)應戴手套及口罩，避免沾到皮膚及吸入，若不慎接觸，應立即用大量水沖洗后就醫。PMSF溶于異丙醇后置于-20℃長(cháng)期保存，保存中易析出結晶，用前取出待結晶溶化后再使用

　　3.甲醛：有刺激性氣味，易揮發(fā)，其蒸汽強烈刺激粘膜、眼睛，具有致癌性。使用時(shí)應戴手套及口罩，在通風(fēng)櫥內操作。

　　4.甲醇：有毒，能引起失明。DTT：很強的還原性，散發(fā)難聞的氣味?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收危害健康。當使用固體或高濃度儲存液時(shí)，戴手套和護目鏡，在通風(fēng)櫥中操作。beta-巰基乙醇：可致命，對呼吸道、皮膚和眼睛有傷害。丙酮：對神經(jīng)系統有麻醉作用，并對黏膜有刺激作用。